桑叶水提物对小鼠胆固醇代谢的影响与机理研究

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导师姓名
丁晓雯  黄先智
学科专业
食品科学
文献出处
西南大学   2017年
关键词
桑叶水提物论文  胆固醇代谢论文  降血脂论文
论文摘要

随着生活水平的提高和饮食习惯的变化,高血脂的发病率在逐年增加。血脂异常是一种代谢紊乱,是体内总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的一种或多种发生异常所致,是导致心血管疾病发病率增高的主要危险因素。通过控制血清总胆固醇(TC)控制动脉粥样硬化,进而可以降低心血管疾病的发生率。现代医学证明,桑叶具有抗病毒、抗菌、降血糖和降血脂作用,但是,在桑叶降低胆固醇效果与其作用机制方面的研究较少。本研究从胆固醇代谢方面对桑叶水提物对高脂饮食雌性昆明种小鼠胆固醇代谢的影响和机制进行研究。本研究的主要结果:(1)研究桑叶水提物对实验雌鼠基本生长指标影响中发现,每天灌胃8mg kg-1·bw(以DNJ含量换算)桑叶水提物,可以显著降低体重增长率、肝脏系数、脂肪系数、肝脂含量(P<0.05)。与高脂对照组相比,灌胃16周,雌鼠体重增长率降低24.22%(P<0.05),肝脏系数降低16.22%(P<0.05),脂肪系数降低54.05%(P<0.05),肝脂含量降低38.29%(P<0.05)。桑叶水提物灌胃16周,肝脏组织大部分结构基本恢复正常,肝细胞索排列呈放射状,肝小叶分界清楚,肝窦清晰可见,细胞核大小正常,位置居中,汇管区无炎症细胞浸润。表明桑叶水提物可以控制实验雌鼠体重增加量、肝脏和脂肪系数、并且可以降低肝脂含量和改善肝细胞形态,降低肝脏细胞脂肪变性。(2)研究桑叶水提物对血脂和肝脏中胆固醇代谢相关酶活性的影响中发现,每天灌胃8mg·kg-1·bw(以DNJ含量换算)桑叶水提物,可以显著降低血清TC、TG、LDL-C、Apo B水平和动脉粥样硬化指数(AI),升高HDL-C和Apo A1水平(P<0.05)。与高脂对照组相比,灌胃16周,雌鼠TC水平降低39.97%(P<0.05),TG水平降低52.08%(P<0.05),LDL-C水平降低28.93%(P<0.05),Apo B水平降低48.58%(P<0.05),AI值降低44.05%(P<0.05),HDL-C水平升高48.22%(P<0.05),Apo A1水平升高46.77%和56.88%(P<0.05)。每天灌胃8mg·kg-1·bw(以DNJ含量换算)桑叶水提物,可以显著升高肝脏LCAT、CYP7A1和TBA活性或含量、降低HMG-COA还原酶活性(P<0.05)。与高脂对照组相比,灌胃16周,雌鼠LCAT含量升高23.03%(P<0.05),CYP7A1含量升高27.43%(P<0.05),HMG-COA还原酶活性水平降低37.88%(P<0.05)。表明桑叶水提物可通过提高血清HDL-C和Apo A1含量、升高肝脏LCAT活性促进胆固醇的转运,降低TC、TG、LDL-C和Apo B水平,并且降低动脉粥样硬化指数;可以显著降低肝脏HMG-COA还原酶活性,升高CYP7A1的活性,达到降血脂的目的。(3)研究桑叶水提物对肝脏中胆固醇代谢相关因子m RNA表达的影响中发现,每天灌胃8mg·kg-1·bw(以DNJ含量换算)桑叶水提物,可以显著上调LDL-R、LCAT、SREBP2、CYP7A1、FXR和LXR m RNA表达量(P<0.05),下调CETP m RNA表达量(P<0.05)。与高脂对照组相比,灌胃16周,雌鼠LDL-Rm RNA表达量上调56.99%(P<0.05),LCAT m RNA表达量上调158.38%(P<0.05),SREBP2m RNA表达量上调115.96%;CYP7A1 m RNA表达量上调41.39%(P<0.05),FXRm RNA表达量上调60.86%(P<0.05),LXRm RNA表达量上调44.35%(P<0.05),CETP m RNA表达量下调50.63%(P<0.05)。与高脂组相比,桑叶水提物对肝脏HMG-COA还原酶m RNA表达无显著影响。表明桑叶水提物可通过上调SREBP2的表达,激活LDL-R的表达,结合血液中的LDL,降低血浆胆固醇的含量;上调LCAT和下调CETP的表达,促使自由胆固醇结合到HDL上,使HDL转化为HDL-C;桑叶水提物LXR、FXR和CYP7A1间的前反馈和负反馈调节,促进胆固醇转化成胆汁酸进入肠肝循环和排出体外,从而达到降血脂的效果。(4)研究桑叶水提物对胆固醇在粪便的代谢产物影响中发现,每天灌胃8mg·kg-1·bw(以DNJ含量换算)桑叶水提物,可以显著提高粪固醇、TBA和SCFAs水平。与高脂对照组相比,灌胃16周,雌鼠粪固醇水平升高18.35%(P<0.05),TBA水平升高18.35%(P<0.05),SCFAs水平升40.70%(P<0.05),乙酸水平升高33.41%(P<0.05),丙酸水平升高106.44%(P<0.05),丁酸水平升高49.20%(P<0.05),异丁酸水平升高106.54%(P<0.05),戊酸水平升高79.20%(P<0.05),异戊酸水平升高36.53%(P<0.05)。通过多元线性回归分析,在P<0.1的显著水平下,乙酸、丙酸、戊酸和丁酸的含量可影响血清TG水平,乙酸、异戊酸、戊酸和丙酸的含量可影响动脉粥样硬化指数(AI)。结果表明,桑叶水提物可改善雌鼠肠道环境,调节肠道微环境,促进肠道微生物发酵产生短链脂肪酸,促进粪固醇和胆汁酸的排出,进而达到降血脂的作用。

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摘要

ABSTRACT

第1章 文献综述

1.1 胆固醇结构及其生理功能

1.2 胆固醇代谢

1.2.1 胆固醇的摄入

1.2.2 胆固醇的合成

1.2.3 胆固醇的酯化

1.2.4 胆固醇的转化

1.3 肠道菌群代谢产物

1.4 食品中功能性成分降脂的作用机理

1.4.1 膳食纤维

1.4.2 多糖

1.4.3 多酚

1.4.4 生物碱

1.4.5 皂苷

1.4.6 其他

1.5 桑叶的活性成分及应用研究

1.5.1 桑叶的主要活性成分

1.5.2 桑叶在高脂血症方面的研究现状

1.6 研究的目的与意义

1.7 本文研究的主要内容

第2章 桑叶水提物小雌鼠基本生长指标的影响

2.1 前言

2.2 材料与方法

2.2.1 实验材料

2.2.2 实验试剂

2.2.3 实验仪器

2.2.4 实验方法

2.2.5 数据分析

2.3 结果与分析

2.3.1 桑叶水提物中活性成分的含量及喂饲实验动物的剂量换算

2.3.2 桑叶水提物对体重增加率的影响

2.3.3 桑叶水提物对肝脏系数的影响

2.3.4 桑叶水提物对脂肪系数的影响

2.3.5 桑叶水提物对肝脂的影响

2.3.6 桑叶水提物对肝脏组织形态的影响

2.4 本章小结

第3章 桑叶水提物对小鼠血脂和肝脏胆固醇代谢相关酶的影响

3.1 前言

3.2 材料与方法

3.2.1 实验材料

3.2.2 实验试剂

3.2.3 实验仪器

3.2.4 实验方法

3.2.5 数据分析

3.3 结果与分析

3.3.1 桑叶水提物对血脂水平的影响

3.3.2 桑叶水提物对载脂蛋白的影响

3.3.3 桑叶水提物对肝脏LCAT活性的影响

3.3.4 桑叶水提物对肝脏HMG-COA还原酶活性的影响

3.3.5 桑叶水提物对肝脏CYP7A1活性的影响

3.4 本章小结

第4章 桑叶水提物对小鼠肝脏中影响胆固醇代谢相关因子m RNA表达的影响

4.1 前言

4.2 材料与方法

4.2.1 实验材料

4.2.2 实验试剂

4.2.3 实验仪器

4.2.4 实验方法

4.2.5 数据分析

4.3 结果与分析

4.3.1 桑叶水提物对胆固醇转运相关因子m RNA表达的影响

4.3.2 桑叶水提物对胆固醇合成相关因子m RNA表达的影响

4.3.3 桑叶水提物对胆汁酸代谢相关因子m RNA表达的影响

4.4 本章小结

第5章 桑叶水提物对小鼠粪便中胆固醇代谢相关产物的影响

5.1 前言

5.2 材料与方法

5.2.1 实验材料

5.2.2 实验试剂

5.2.3 实验设备

5.2.4 实验方法

5.2.5 数据分析

5.3 结果与分析

5.3.1 桑叶水提物对粪固醇的影响

5.3.2 桑叶水提物对粪便胆汁酸的影响

5.3.3 桑叶水提物对粪便短链脂肪酸的影响

5.3.4 短链脂肪酸与血清TC和动脉粥样硬化指数的相关性分析

5.3.5 以TC和动脉粥样硬化指数为因变量的多元回归分析

5.4 本章小结

第6章 结论与展望

6.1 结论

6.2 展望

参考文献

附录

致谢

研究生期间论文发表情况

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