七种中药对口腔白色念珠菌的体外抑制作用

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导师姓名
陈惠珍
学科专业
口腔临床医学
文献出处
河北医科大学   2015年
关键词
五味子论文  当归论文  黄连论文  瑞香狼毒论文  吴茱萸论文  金银花论文  透骨草论文  白色念珠菌论文
论文摘要

白色念珠菌,广泛存在于自然界及人体的口腔、呼吸道、消化道及阴道黏膜中,为条件致病性真菌,正常情况下不会导致疾病发生。当某些因素破坏了机体内菌群平衡,白色念珠菌则转变为致病菌,在局部大量生长繁殖,引起局部甚至全身性疾病。近年来,由于广谱抗菌药物、激素、免疫抑制剂等药物的大量应用,介入手术的普及,恶性肿瘤、艾滋病等疾病发病率逐年上升等因素,使得念珠菌感染发病率逐年升高。目前,唑类药物是临床治疗和预防念珠菌感染的首选药物,唑类药物的大量应用,在治疗念珠菌感染的同时又使念珠菌的耐药性提高,尤其是白色念珠菌。因此,寻找高效低毒、安全有效且不易产生耐药菌株的新型药物迫在眉睫。我国有着丰富的中药资源,在长期研究中发现,很多中药都具有抗白色念珠菌的作用,而且某些中药在较低浓度时就具有显著效果。因此,研究中药对白色念珠菌的抑制作用,对白色念珠菌的临床用药具有积极的指导意义。目的:研究七种中药五味子、当归、黄连、瑞香狼毒、吴茱萸、金银花、透骨草对口腔白色念珠菌临床菌株的抑制作用;确定七种药物的75%乙醇提取物在不同浓度作用下对口腔白色念珠菌临床菌株的抑制率,为中药抗白色念珠菌药物的研究、开发提供实验依据。方法:1七种中药的提取将七种中药干燥、粉碎,均称量60 g,分别置于1000 ml容量瓶中,用75%乙醇溶液600 m L浸泡1.0h,81℃水浴回流提取1.0h,保留提取液,重复提取三次,提取液合并,减压过滤,滤液分别减压蒸馏至无乙醇味,浓缩物用蒸馏水定容为2 g/m L生药。然后低温离心,取上清液,用0.22μm孔径的滤菌器滤除提取物中细菌后置于棕色瓶中,于冰箱中4℃保存备用。2七种中药提取物的体外抑菌实验实验菌株为口腔白色念珠菌临床菌株。实验应用改良倍比稀释法检测七种中药75%乙醇提取物对口腔白色念珠菌的抑制作用。取无菌小试管5支作为一组,分别标记试管标号为1、2、3、4、5,共23组。每管加沙氏培养液1.0 ml,再向第一管加药液1.0 ml,从第一管开始倍比稀释至每根试管中药物的最终浓度依次为:1 g/ml,0.5 g/ml,0.25 g/ml,0.125 g/ml,0.0625 g/ml。同样方法制备23组试管,每组五根,实验时将23种实验菌液分别加入这23组含药液培养基的试管中,每管0.1 ml菌液。同时另取3支试管,分别标记为“沙氏培养液对照”,“药物原液对照(2 g/ml)”,“测试菌生长对照”。以上为一种药物实验模型,同样建立其余六种药物实验模型。所有试管摇匀后放置37℃恒温箱内,培养24 h后观察结果。在对照管符合要求的情况下,将各实验管的培养物接种至沙氏琼脂培养基的平板上,确定是否有细菌生长。37℃恒温箱内,培养24h后观察结果,以琼脂平板上完全无细菌生长为标准,记录实验数据,计算七种中药75%乙醇提取物在不同浓度作用下对23株白色念珠菌临床菌株的抑制率。结果:七种中药的75%乙醇提取物在浓度分别为1.0 g/ml、0.5 g/ml、0.25g/ml、0.125 g/ml、0.0625 g/ml时对口腔白色念珠菌的抑制率分别为:五味子:91.30%、17.39%、8.70%、4.35%、4.35%当归:73.91%、17.39%、4.35%、4.35%、4.35%黄连:65.22%、30.43%、13.04%、8.70%、4.35%瑞香狼毒:43.48%、13.04%、8.70%、4.35%、4.35%吴茱萸:43.48%、13.04%、13.04%、8.70%、4.35%金银花:20.09%、8.70%、8.70%、4.35%、4.35%透骨草:13.04%、4.35%、4.35%、4.35%、4.35%七种中药的75%乙醇提取物在各浓度下对第四株口腔白色念珠菌临床菌株的抑制率均为100%。吴茱萸75%乙醇提取物在各浓度下对第五株口腔白色念珠菌临床菌株的抑制率均为100%。结论:1体外抑菌试验显示,五味子、当归、黄连、瑞香狼毒、吴茱萸、金银花、透骨草七种中草药对口腔白色念珠菌有不同程度的抑制作用,且均呈现浓度依赖性。药物浓度为1 g/ml时对白色念珠菌的抑制作用最好,抑制作用大小顺序为:五味子>当归>黄连>瑞香狼毒、吴茱萸>金银花>透骨草。2不同菌株对同一种药物的敏感程度不同,可能与菌株来源于不同的机体有关。

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材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 中草药抗白色念珠菌作用的研究进展

参考文献

致谢

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