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结直肠癌奥沙利铂耐药相关蛋白的筛选与鉴定

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文献出处
肿瘤  2013年03期
机 构
南京医科大学附属淮安第一医院肿瘤内科,南京医科大学肿瘤中心
基 金
江苏省自然科学基金资助项目(编号:Bk2008192),江苏省卫生厅面上项目(编号:H200652)
关键词
结直肠肿瘤论文  抗药性论文  肿瘤论文  电泳论文  凝胶论文  双向论文  质谱分析法论文  奥沙利铂论文  细胞论文
论文摘要

目的:采用蛋白质组学技术筛选结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中对化疗药物奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药的相关蛋白,以期为CRC的个体化治疗提供生物标志物。方法:建立L-OHP耐药细胞株HT-29/L-OHP,提取细胞总蛋白,采用二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)和基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem masss pectrometry,MALDI-TOF-MS)筛选并鉴定与亲本HT-29细胞差异表达的蛋白,并应用蛋白质印迹法对鉴定获得的部分蛋白进行验证。结果:建立CRC亲本细胞株HT-29和L-OHP耐药细胞株HT-29/L-OHP蛋白的2-DE图谱,共获得表达差异2倍以上的蛋白质点38个,经MALDI-TOF-MS分析,有37个得到鉴定,与亲本细胞相比,表达上调的有17个,表达下调的20个;蛋白质印迹法检测结果显示,多聚胞嘧啶结合蛋白1[poly(C)-binding protein-1,PCBP1]和TUBB2A(tubulin beta-2A)蛋白在HT-29/L-OHP细胞中表达上调,膜联蛋白A3(annexin A3,ANXA3)和磷酸化应激诱导蛋白(stress-induced-phosphoprotein 1,STIP1)表达下调,与MALDI-TOF-MS的实验结果相一致。结论:筛选获得37个与CRC对L-OHP耐药的相关蛋白,为进一步研究CRC对L-OHP耐药机制提供了有力的实验依据。

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