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双向电泳—质谱法探索实验性重症肌无力大鼠疾病相关蛋白

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文献出处
中华中医药学刊  2007年12期
关键词
重症肌无力论文  蛋白质组学论文  双向电泳论文  血清论文  差异蛋白论文
论文摘要

目的:分离和鉴定实验性自身免疫性重症肌无力大鼠血清差异表达蛋白,寻找并比较疾病相关蛋白,以进一步阐明重症肌无力的发病机制。方法:采用二维蛋白电泳技术分离正常组和模型组大鼠血清差异表达蛋白,凝胶经银染显色后,Bio-Rad凝胶扫描仪扫描,Imagemaster图像软件分析,差异蛋白点用基质辅助激光解析电离-两级飞行时间串联质谱法进行鉴定。结果:通过双向电泳,建立血清蛋白质双向电泳图谱,重症肌无力组血清双向电泳图谱可见678个蛋白点,而正常对照组可见702个蛋白点。选取9个具有明显差异的蛋白点进行质谱鉴定,共鉴定出5种蛋白质。结论:正常组和模型组大鼠间存在一定的差异表达蛋白,该类蛋白为一些与机体免疫应答、信息调控相关的蛋白质。

论文目录
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1 材料与方法
  1.1 材料
    1.1.1 EAMG模型的制备与标本采集
    1.1.2 主要试剂
    1.1.3 主要仪器
  1.2 方法
    1.2.1 血清总蛋白质的提取与定量
    1.2.2 等电聚焦
    1.2.3 SDS-PAGE垂直电泳
    1.2.4 凝胶银染
    1.2.5 图像分析
    1.2.6 MALDI-TOF-TOF串联质谱分析
    1.2.7 数据库检索
2 实验结果
  2.1 蛋白浓度及2-DE结果
  2.2 差异蛋白质点的鉴定
3 讨 论
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