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双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析促癌剂TPA诱导NIH3T3细胞表达变化的蛋白质

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文献出处
中山大学学报(医学科学版)  2004年01期
机 构
第一军医大学肿瘤研究所,中山大学中山医学院寄生虫学教研室,第一军医大学肿瘤研究所,广东,广州,510515,广东,广州,510080,广东,广州,510515,广东,广州,510515
基 金
广东省十五攻关项目基金资助项目(A1080201),国家973科研基金资助项目(2001CB510208)
关键词
蛋白质组学论文  聚丙烯酰胺双向凝胶电泳论文  基因表达论文  质谱论文
论文摘要

[目的]寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质,为阐明TPA在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。[方法]用TPA刺激NIH3T3细胞,分别提取实验组和对照组的NIH3T3细胞的总蛋白质,通过聚丙烯酰胺凝胶双向电泳,硝酸银染色后用软件分析寻找差异表达的蛋白质,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。[结果]软件分析显示TPA处理后的NIH3T3细胞中有明显的差异表达蛋白质,质谱鉴定表明TPA处理后,表达上调的蛋白质有线粒体基质蛋白P1前体、微管蛋白beta-5链;TPA处理后明显表达下调的蛋白质有galectin-1、N-myc下游调节基因1蛋白。[结论]TPA刺激NIH3T3细胞后可以下调生长抑制基因的表达,同时上调与细胞增生相关基因的表达。因此,促癌剂TPA可能对NIH3T3细胞有促进增生的作用。

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