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水稻叶片蛋白质组双向电泳实验条件的改进

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文献出处
应用与环境生物学报  2012年05期
关键词
水稻论文  双向电泳论文  蛋白质组学论文  冰乙酸论文  考马斯亮蓝论文
论文摘要

为获得高分辨率、高灵敏度的2-DE图谱,以3叶1心期的水稻幼苗叶片为研究材料,对蛋白样本的制备、上样量及考马斯亮蓝R-250染色等关键步骤进行探讨,优化实验条件.结果表明,脱色后凝胶经5%冰乙酸浸泡后得到的2-DE图谱蛋白质点明显增多,图谱背景清晰.同时,不同公司考染试剂CBB R-250染色灵敏度存在较大的差别,应予以尝试.同其它方法相比,本方法简便、稳定,灵敏度高,可操作性强,对水稻蛋白质组学研究具有一定的指导意义.

论文目录
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1 材料与方法
  1.1 材料培养
  1.2 主要试剂及仪器
  1.3 溶液的配制
  1.4 实验方法
    1.4.1 总蛋白的制备 (所有步骤均在4℃进行)
    1.4.2 蛋白质溶解及定量
    1.4.3 2-DE
2 结果与分析
  2.1 上样量的优化
  2.2 脱色方法的优化
  2.3 不同染色试剂蛋白质双向电泳图谱比较
  2.4 实验的重复性
3 讨论
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